病理特殊染色技术服务-科研技术服务

特殊染色服务包括:胶原纤维染色(Masson等)、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色(磷钨酸苏木素)、脂肪染色(苏丹III)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。

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2016年11月09日

HE染色技术服务-HE染色服务公司-HE染色法

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荧光原位杂交(FISH)科研技术服务

实验简介:

为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。牛启生物特殊染色服务包括:胶原纤维染色(Masson等)、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色(磷钨酸苏木素)、脂肪染色(苏丹III)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。



关于染色液体的一般要求:

·定期检查液体有无变坏的迹象。      ·所有液体应该由配制液体的人标明最初的日期。

·使用时要注意防止液体交叉污染      ·用蒸馏水或双蒸馏水配制液体。

·使用分等级的化学试剂。            ·使用组织技术专家证明合格的染料。

·随时将装有液体的瓶子塞好。      

·冷藏液体应该倒入染色缸内,在室温下复温染色,液体瓶应该及时放回冰箱。

·所有染液使用后立即放回到搁板上防止混乱。 

·始终使用干净的玻璃器皿。

·清楚天平、pH表等是否准确。


一、胶原纤维

    胶原纤维是人体中的结缔组织的主要成分,分布在全身的各个部位,组成胶原纤维的主要成分是胶原蛋白。新鲜时呈白色,故一般称为白色纤维。当有病变时这些纤维可发生变形,常出现的就是胶原纤维的坏死,胶原纤维在稀酸里可发生膨胀,变成胶样物。它们能被酸性染料染成深浅不一的粉红色,这些往往跟淀粉样物难以区别。

Masson氏三色染色法: 胶原纤维呈现绿色或蓝色,细胞核呈现灰黑或灰蓝色,肌肉和胞质红细胞呈现红色。


二、网状纤维染色

    网状纤维是一种纤细的纤维。它沿着网状细胞和突起分支,并互相交织成网,因而被称为网状纤维,又因这种纤维对银的浸染着色特别显著。故又称为嗜银纤维。它主要由III型胶原蛋白构成。它主要分布于骨髓、脾、淋巴结、肝和肺等脏器。癌组织中间未见有网状纤维,但在其边缘可见有大量的网状纤维,但在其边缘可见有大量的网状纤维围绕,俗称癌巢。

网状纤维显示方法:

    1.Gomori's法,结果:网状纤维黑色,核红色,胶原纤维黄棕色。

    2.Godon and sweet's法,网状纤维显示黑色,如有对比染色,细胞核显示红色,胶原纤维不着色。

    3.Wilder's法,结果:网状纤维显示黑色,其余着对比染色,胶原纤维不着色。

    4.Foot's法,结果:网状纤维显示黑色,其它着染对比染色,胶原纤维不着色。


三. 弹性纤维

    弹性纤维主要由弹性蛋白(一种黄色硬蛋白,它是黄色弹性纤维组织的主要成分,干燥时易脆,而湿润时呈弯曲并富弹性)构成。它广泛分布于全身的各个部位,尤以循环系统,呼吸系统和皮肤系统为甚。新鲜时它呈黄色,固又称为黄色纤维。弹性纤维与胶原纤维交织在一起,在HE染色的标本上,含量少时不易与胶原纤维区别,含量多时呈折光性强的淡粉红色。

    弹性纤维与胶原纤维,网状纤维不同,它极难容于有机或无机的溶液里。牛启生物


弹性纤维的染色方法

    1.Weigert氏雷锁辛品红法(1898)(Weigerts resorcin-fuchsin method)试剂的配制:

    结果:弹性纤维:深蓝或深黑色,其余成分视用何种对比染色而定。

    2.Gomori's醛品红法(1950)(Gomrori’s aldehyde-fuchsin method)

    结果:弹性纤维深蓝色,背景不同程度的黄色。 

 

    3.地衣红技术(Unna.1891)

    结果:弹性纤维棕红色或深棕色。


   4.Verhoff氏酒精苏木素技术(1908)

    (Verhoff's alcoholic hematoxylin ted)

    结果:弹性纤维黑色,背景据不同的对比染色而定。


四  横纹肌染色

    横纹肌的染色方法

    磷钨酸苏木素染色法(PTAH)法

    结果:横纹肌纤维,纤维素,胞核,核仁和神经胶原纤维等呈蓝色,胶原纤维,网状纤维,软骨基质呈棕红色,弹力纤维呈紫色。



五.基底膜的显示

    (一)基底膜的结构

    基底膜一般是由纤维的结缔组织,粘多糖和蛋白质所构成,基底膜内主要含有IV形胶原蛋白,蛋白多糖和层粘连蛋白,这些物质的存在,给显示基底膜提供了物质基础。

    (二)显色的方法

    1.六胺银法(Hexamine silver)

    Jones六胺银染色法的改良法 [5]

    结果:基底膜呈出深黑色,背景呈现绿色。

    2.AFOG法

    结果:基底膜,胶原纤维显示不同程度的蓝色,红白球及背景呈桔黄色,管型蛋白呈鲜红色。


六.纤维素染色法:

    纤维素又称纤维蛋白,在正常的情况下,它是血液内的纤维蛋白原分子聚合而形成的一种特殊蛋白质。正常的组织是见不到纤维素的。但是,当组织受损,血管内皮受到了较为严重的损害,血管通透性随之升高,则可导致大量纤维蛋白的漏出。纤维素性炎症就是以纤维素渗出为主的一种抗损害的症状。在HE感染时于镜下可见到大量红染的纤维素交织呈网状,常可表现为片状红染,质地均匀的物质,常发生玻璃样变。病变常可发生于某些细菌的感染,如白喉杆菌、痢疾杆菌和肺炎双球菌。渗出的纤维素、白细胞和坏死的粘膜上皮等混合在一起,形成一种灰白色的膜状物称假膜。

MSB 的改良法:(Martius, Scarlet, Blue methocl)

    结果:早期纤维素:黄色;中期纤维素:红色;晚期纤维素:蓝色;细胞核灰黑色;胶原纤维蓝色;红血细胞黄色。背景:黄色。SARS患者肺部病变可明显显示上述的病理变化。



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